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    芍药苷稳定性研究
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    芍药苷稳定性研究*

    解江纯,刘志东,田慧,王颖
    (天津中医药大学现代中药发现与制剂技术教育部工程研究中心,天津300193)

    摘要:[目的] 研究芍药苷在不同温度及 pH 条件下的稳定性。[方法] 采用高效液相色谱法在不同温度及 pH 条件下,测定芍药苷在不同时间的含量变化。 [结果] 芍药苷在 pH=9.0 条件下,高于 60 ℃在 3 h 完全降解,在酸性条件下不降解。 [结论] 芍药苷在酸性条件下稳定,在碱性条件下随温度的升高,降解加速。

    关键词:芍药苷;温度;pH;稳定性

    中图分类号:R284
    文献标识码:A
    文章编号:1672-1519(2010)04-0344-02
    芍药苷(Paeoniflorn)为黄酮类化合物,是白芍和赤芍的主要活性成分之一。具有保肝、抗炎、免疫调节等作用。近年来,学者们对芍药苷的药理活性进行越来越多的研究。研究表明,芍药苷具有抗凝、抗动脉粥样硬化、抗血栓、抗心肌或脑组织损伤等广泛药理作用[1-6]。根据芍药苷的性质,本文设计并考察其在不同磷酸盐缓冲液(PBS)及不同温度条件下的稳定性,从而为药材的提取及制剂的研究提供参考依据。

    1
    仪器与试药
    SHIMADZU 高效液相色谱仪(日本岛津),SPD-10A VP UV-VIS 检测器,LC-10AT 输液泵;PHS-3C精密 pH 计(上海雷磁仪器厂);DKB-50A 型超级恒温水槽(上海精宏试验设备有限公司)。

    芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号:110736-200933[T1]);芍药苷提取物(含量>90%);甲醇(色谱纯,天津康科德科技有限公司);其他试剂均为分析纯。

    2
    方法与结果
    2.1
    分析方法的确定
    2.1.1
    色谱条件
    Diamonsil C18色谱柱 (4.6 mm×250 mm,5.0 μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸水溶液
    (40∶60);检测波长:230nm;柱温:30℃;流速:1mL/min;进样量 20 μL。

    2.1.2标准曲线的绘制

    取芍药苷对照品适量,精密称定,用甲醇溶解,分别移取不同量至 10 mL 量瓶中,配制成浓度为 0.55、1.1、3.3、5.5、8.8、11.0 mg/L系列对照品溶液。照 2.1.1 项下的色谱条件进行测定,记录峰面积,以峰面积(A)对浓度(C)进行线性回归。线性方程为 A=39 485 C-6 228.3,r=0.999 9,线性范围 0.55~11.0 mg/L。

    2.1.3精密度实验
    按上述操作方法,配制 1.1、5.5、8.8 mg/L 3 个浓度的芍药苷对照品溶液,于 1 d内重复测定 5 次,计算日内精密度;每日测定 1 次,连续测定 5 d,计算日间精密度。低、中、高 3 个浓度
    的日内精密度峰面积的相对均数标准差(RSD)分别为 1.4%、1.8%、0.7%,日间精密度 RSD 分别为3.4%、3.2%、2.8%。
    2.2芍药苷稳定性研究
    2.2.1温度对芍药苷固体粉末的影响
    称取芍药苷样品适量,放入安瓿中,分别于(50±1)℃,(60±1)℃,(70±1)℃,(80±1)℃条件下加热,并于 0,1,2,3,4,6,8 h 取样,将样品溶于甲醇中定容至 50 mL。将样品稀释 10 倍,进高效液相色谱(HPLC)进行测定,结果表明温度对芍药苷固体没有影响,结果见表 1。

    2.2.2pH 值及温度对芍药苷降解速率的影响

    称取芍药苷样品适量,分别用 pH2.0,5.0,8.0,9.0 的PBS 缓冲液及水溶解,取适量溶液置于三角瓶中,密封,于(50±1)℃,(60±1)℃,(70±1)℃,(80±1)℃恒温水浴中,并分别于 0,1,2,3,4,6,8 h 取样,每次取样 2 mL,过 0.45 μm 滤膜,进 HPLC 测定各时间点的溶液浓度(Ct),结果见下图。结果表明,芍药苷在酸性条件下稳定性良好,对碱性环境敏感,在水溶液中已有微弱降解,随 pH 值增加,降解越来越严重。




    3讨论
    在实验过程中,发现芍药苷在 PBS=8.0 和 PBS=9.0 溶液中,不同温度条件下水解产生不同的降解产物,目前尚未见此方面报道,具体化合物结构需进行深入研究。
    芍药苷对碱性环境和温度非常敏感,所以在提取过程中应注意避免在碱性的条件下进行。另外由
    于芍药苷在碱性环境下不稳定,在制剂中应注意剂型的选择。
    参考文献:
    [1]
    刘超,王静,杨军,等.赤芍总苷活血化瘀作用的研究[J].中药材,2000,23(9):557-560.
    [2]
    孙大军,祁功才,吕文伟,等.赤芍总苷对实验性血栓形成的影响及其作用机制[J].中国老年学杂志,2006, 26(8):1080-1081.
    [3]
    黄海霞,莫晓霞,耿涛,等.赤芍总苷对培养乳鼠心肌细胞损伤的保护作用[J].生命科学研究,2005,9(2):177-180.
    [4]
    杨军,王静,刘超,等.赤芍总苷对实验性脑缺血的保护作用[J].中药材,2001,24(2):124-125.
    [5]
    陈广斌,吴铁,林坚涛,等.芍药苷对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中脑细胞调亡的影响[J].华西药学杂志,2009,24(4):354-356.
    [6]
    林桂平,向秋玲,陈健文,等.芍药苷对脑缺血损伤的保护作用及其对脑血管通透性的影响[J].热带医学杂志,2009,9(2):151-154.

    Study on stability of paeoniflorin
    XIE Jiang-chun, LIU Zhi-dong,TIAN Hui, et al
    (Tianjin University of TCM, Engineering Research Center of Modern Chinese Medicine

    Discovery and Preparation Technique, Ministryof Education, Tianjin 300193, China)
    Abstract: [Objective] To investigate the stability of paeoniflorin in different pH and temperature. [Methods] The changes of paeoniflorinafter placed for some time were determined by HPLC in different temperature and pH values. [Results] Paeoniflorin was completelydegradated after placing at pH 9.0 or above a temperature of 60℃ for 3 h. No degradation was found in acid conditions. [Conclusion]paeoniflorin was stable in acid medium and degradation was accelerated when temperature increased or in a basic condition.
    Key words: paeoniflorin; temperature; pH; stability



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